用XM-15S大面積紫外線燈進(jìn)行紫外線誘變育種,首先應(yīng)準(zhǔn)備孢子懸浮液。將新鮮食用菌無(wú)菌孢子移入5毫升無(wú)菌生理食鹽水(經(jīng)滅菌處理 的0.9%溶液),或磷酸緩沖溶液(由15克磷酸氫二鈉和2克磷酸二氫鉀共溶于1000亳升經(jīng)滅菌而得的蒸餾水)中,搖勻后即成孢子懸浮液,萁濃度以每毫升含孢子100萬(wàn)至1億 個(gè)為宜。
誘變時(shí),在暗室內(nèi)開(kāi)啟XM-15S大面積紫外線燈,調(diào)整紫外線燈臺(tái)式支架的隔板高度。開(kāi)始先開(kāi)燈20分鐘,波長(zhǎng)穩(wěn)定后取5亳升孢子懸浮液 倒入直徑6厘米的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,揭開(kāi)皿蓋,搖動(dòng)培養(yǎng)皿, 使照射均勻,照射時(shí)間0.5—1.0分鐘,照射后的抱子懸浮液每毫升含活孢子數(shù)在10—1000萬(wàn)個(gè)之間。要得到單菌落,得 先用無(wú)菌水樣釋至每亳升10—100個(gè),再取稀釋液0.2毫升, 涂布于裝有瓊脂的培養(yǎng)皿上,在25℃溫度下培育5—10天, 待菌落出現(xiàn)后,選純正、健壯的單菌落移入斜面試管培養(yǎng), 并做拮抗試驗(yàn)。
拮抗試驗(yàn)是取處理和未處理的菌絲各一塊,接在同一斜面上,相距1 一2厘米,如處理后的孢子已發(fā)生變異,其菌絲與未處理的菌絲在相接處就會(huì)發(fā)生拮抗,形成一條明顯的拮抗線;若未發(fā)生變異,則兩方面的菌絲相連接成一體。
2024-03
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2024-03
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2024-03
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2023-11
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2023-09
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